terça-feira, 15 de junho de 2010

Identificação de Neisseria gonorrhoeae por Biologia Molecular em peça de roupa de um acusado de crime sexual contra uma criança no Reino Unido.

Quando adquirimos um resfriado de um parente ou amigo, não temos como provar cientificamente que a doença foi transmitidas por eles, pois o vírus responsável pelo resfriado é adquirido pelo ar em partículas de aerossol. Mas quando a é uma doença de transmissão interpessoal, como é o caso das DSTs – Doenças Sexualmente transmissíveis?
Martin et al. (2007) relataram um caso em que utilizaram técnicas de biologia molecular para identificação da bactéria Neisseria gonorrhoeae como evidencia de crime de abuso sexual contra uma criança no Reino Unido, ligando a bactéria encontrada nas roupas intimas do acusado ao material biológico coletado da vitima.
A bactéria Neisseria gonorrhoeae é o principal agente etiológico da gonorréia, patologia ocasionada exclusivamente por contato sexual. Sua identificação em laboratórios para fins clínicos é comum, nunca foi utilizado para fins legais (ISON, 2006).
As N.gonorrhoeae são diplococos (cocos aos pares) Gram negativas e são isoladas através de meio de cultura especifico Thayer Martin encubado em estufa bacteriológica à 37ºC.
ISON, 2006 et al utilizaram as técnicas de cultivo para N.gonorrhoeae para comparar a cepa bacteriana com a cepa encontrada na criança, vitima do abuso sexual.
Os pesquisadores utilizaram o meio de cultura GC (OXOID) suplementado com Vitox® à 1% e encubado em estufa bacteriológica à 36ºC em ambiente com 5% de dióxido de carbono, além de testes bioquímicos confirmatórios da oxidase e outro teste imunológico.
Utilizaram técnica de extração de DNA da cepa coletada para sua amplificação pela técnica de PCR (Ração de Polimerase em Cadeia), utilizando dois marcadores genéticos ompIII e cppB e incluindo um cepa controle positiva e negativa para cada PCR.
O método definitivo para a comparação das cepas da cultura coletada da vitima e a amostra pesquisada na cueca do acusado foi realizada pelo NG-MAST seqüenciador de DNA especifico para N.gonorrhoeae, onde foi utilizaram outros marcadores por e tbpB. O resultado mostrou-se positivo para o marcador tbpB, o que segundo ISON, 2006 foi suficiente para o acusado ser condenado por abuse sexual em criança e reconhecido como uma excelente ferramenta para a utilização em fins legais.

Referência:
- Gunn, Alan.
Essential forensic biology / Alan Gunn. – 2nd ed. 2009
- Ison, C. et al. Non-cultural detection and molecular genotyping
of Neisseria gonorrhoeae from a piece of clothing - ournal of Medical Microbiology (2007), 56, 487–490